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형질 전환 누에고치로부터 추출한 형광 실크 단백질 용액의 제조 방법 및 이를 이용한 지지체…

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한림대학교 산학협력단
형질 전환 누에고치로부터 추출한 형광 실크 단백질 용액의 제조 방법 및 이를 이용한 지지체 제조 방법
박찬흠, 주형우, 정주연, 이정민, 이옥주, 이민채, 박예리, 박현정, 문보미, 김동욱, 김수현
101640499
1020150116762
바로가기 주소 KIPRIS(DOI) https://doi.org/10.8080/1020150116762
본 발명은 a) 형광 누에고치를 정련제를 포함하는 수용액에 넣어 8-24시간 동안 40-60℃로 가열한 후 증류수로 세척하여 정련된 형광 실크 피브로인을 얻는 단계; b) 상기 정련된 형광 실크 피브로인을 9-9.6M LiBr 100 ㎖ 당 디티오트레이톨 (Dithiothreitol, DTT) 15mg-1.5g을 혼합한 용매에 40-60℃에서 1-5시간 동안 용해시키는 단계; 및 c) 상기 용해된 형광 실크 피브로인을 1차 증류수에서 48-96 시간동안 투석시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 형광 실크 피브로인 용액을 제조하는 방법을 제공한다. 상기 정련제는 알칼레이즈 (alcalase) 및 탄산수소나트륨 (NaHCO3)를 포함하는 것이 바람직하다. 형광 누에고치를 기존 실크 피브로인 용액 제조 방법으로는 낮은 온도에서 실크 피브로인을 용해시키지 못하며, 형광을 잃어버리는 단점이 있다. 하지만 본 발명에 의하면, 환원제를 첨가한 방식은 낮은 온도에서 형광 실크 피브로인 용액을 제조할 수 있으며, 형광을 유지하는 장점이 있다. 따라서 본 발명에 의하면 형광 실크 피브로인의 대량 생산이 가능하고, 생체 적합 형광 단백질을 용이하게 제조하여 제공할 수 있기 때문에, 조직 재생용 지지체, bioimaging 과 biochip을 통한 바이오 센서 등의 바이오 산업에 응용 가능한 재료를 제공할 수 있다.